Окрашивание бактерий

Наблюдать за крошечными бактериями под микроскопом не так просто, как кажется. В колониях, состоящих из миллионов клеток, бактерии могут иметь широкий спектр цветов и текстур. Но подавляющее большинство отдельных бактериальных клеток почти полностью бесцветны.

Клеточная стенка и цитоплазма одной отдельной бактерии просто не будут достаточно видимыми, чтобы вы могли их видеть, даже с помощью дорогого светового микроскопа. Теперь необходимо улучшить видимость этой бактерии - это пятно.

Пятно - это химическое соединение, используемое для улучшения видимости микроскопического объекта или организма. Но не все пятна созданы равными. Тип окрашивания и метод, который используется, зависит от того, на что вы смотрите, какую структуру вы ищете и от чего вы хотите выполнить процедуру окрашивания.

В простой технике окрашивания основной катионный краситель заливается через образец, добавляя цвет к клеткам.

Катион - это просто положительно заряженный ион. Молекулы, из которых состоят основные красители, имеют положительный заряд. Это важно, потому что клеточная стенка и цитоплазма бактериальных клеток имеют отрицательный заряд. Положительно заряженный краситель притягивается к отрицательно заряженным клеткам, усиливая способность окраски прилипать к клеткам и окрашивать их. Теперь эти почти бесцветные клетки будут разных цветов.

Важно отметить, что перед тем, как образец может быть окрашен простым пятном, он должен быть закреплен нагревом на предметном стекле. Во время тепловой фиксации стеклянное стекло над открытым пламенем. Это убивает бактерии, прикрепляет клетки к предметному стеклу и увеличивает поглощение пятен. Этот процесс делает окрашивание более эффективным, но может повредить или исказить клетки, изменяя их внешний вид от действительно естественного, свободно живущего состояния.

В методе негативного окрашивания кислый анионный краситель смешивают с образцом клеток. Краситель меняет цвет фона, а не клеток, заставляя клетки выделяться. Этот процесс можно считать противоположностью простого окрашивания. Анион является отрицательно заряженным ионом, поэтому анионный краситель имеет отрицательный заряд. Когда отрицательно заряженный краситель добавляется к отрицательно заряженным элементам, они отталкиваются друг от друга, что означает, что они раздвигаются. Когда смесь помещают на предметное стекло и сушат на воздухе, получается темно окрашенный фон, окружающий прозрачные, неокрашенные клетки. Прозрачные ячейки хорошо видны, но не подвержены прямому контакту с красителем и искажению от термического закрепления, которое не требуется при отрицательном окрашивании.

Видео обзор

Методы окраски.Метод Нейссера.Микробиология.

Окраска бактерий по Граму

Окрашивание молочнокислых бактерий метиленовым синим

Окраска спор бактерий по методу Циля

Окраска по Граму: методика и реагенты